作者：王曄??趙曉雯??謝立信??于洋?
??? 發(fā)表時(shí)間：中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志??2012年11月??第30卷??第11期?????
??? 【摘要】??
??? 背景??糖尿病是引發(fā)角膜神經(jīng)病變的高危因素之一。沉默信號(hào)調(diào)控因子1(Sirt1)在糖代謝、脂代謝、胰島素分泌調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用，并與神經(jīng)系統(tǒng)性疾病密切相關(guān)。目前，關(guān)于Sirt1與糖尿病性角膜神經(jīng)病變的關(guān)系尚不完全清楚。?
??? 目的??探討Sirt1在1型糖尿病C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜及三叉神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)及其意義，探討Sirt1與糖尿病性角膜神經(jīng)病變的關(guān)系。?
??? 方法??取C57BL/6-lns2Akita/J雄性小鼠與同窩出生的野生型C57BL/6小鼠各8只，分別作為1型糖尿病模型組和正常對(duì)照組。兩組小鼠均在12月齡時(shí)過(guò)量麻醉處死，處死前檢測(cè)空腹血糖、測(cè)體質(zhì)量。取小鼠三叉神經(jīng)節(jié)和角膜組織，采用蘇木精-伊紅染色法檢測(cè)兩組小鼠三叉神經(jīng)節(jié)和角膜組織的組織病理學(xué)變化，用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)三叉神經(jīng)節(jié)和角膜組織中Sirt1蛋白的表達(dá)和定位；用熒光定量PCR法檢測(cè)Sirt1?mRNA在三又神經(jīng)節(jié)和角膜組織中的表達(dá)；采用Westernblot檢測(cè)兩組小鼠三叉神經(jīng)節(jié)和角膜組織中Sirt1蛋白的相對(duì)表達(dá)量，并進(jìn)行比較。?
??? 結(jié)果??C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞大小不均，細(xì)胞排列較為疏松，神經(jīng)纖維排列紊亂，角膜上皮細(xì)胞層數(shù)減少，角膜變??；野生型C57BL/6小鼠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列緊密，細(xì)胞形態(tài)均一，神經(jīng)纖維排列整齊。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果顯示，C57BL/6-1ns2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表達(dá)強(qiáng)度低于野生型C57BL/6小鼠。熒光定量PCR結(jié)果顯示，Sirt1?mRNA在C57BL/6-lns2Akita/J小鼠角膜表達(dá)的灰度值顯著低于野生型C57BL/6小鼠(0.56±0.03?VS.0.98±0.13)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.853，P=0.010)；C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神經(jīng)節(jié)中Sirt1?mRNA表達(dá)的灰度值為2.45±0.8，低于野生型C57BL/6小鼠的2.51士0.22，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.587，P=0.599)。Western?blot檢測(cè)結(jié)果顯示，C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表達(dá)顯著低于野生型C57BL/6小鼠(0.780土0.017?vs.1.300±O.012)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=33.140，P=0.001)；兩組小鼠間三叉神經(jīng)節(jié)中Sirt1蛋白的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(1.100±0.015?vs.1.110±0.017)(t=0.430，P=0.709)。?
??? 結(jié)論??12月齡C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜的神經(jīng)和結(jié)構(gòu)發(fā)育異常，Sirt1參與糖尿病角膜病變的發(fā)病，有可能是潛在的靶點(diǎn)分子。?
